Monkeypox Virüsü CE Nükleik Asit Tespit Kiti Floresan PCR Yöntemi

Monkeypox Virüsü Nükleik Asit Tespit Kiti ( Floresan PCR yöntemi )

[ŞARTNAME]

24test/kit, 48test/kit, 96test/kit

[KULLANIM AMACI]

Bu kit, enfekte olduğundan şüphelenilen hastaların ve teşhis gerektiren diğer hastaların tam kan, serum veya lezyon eksüda örneklerinden ekstrakte edilen Monkeypox viral DNA'sının kalitatif tespitini sağlamak için kullanılır.

[PRENSİP]

Bu kit, amplifikasyon hedef bölgesi olarak Monkeypox virüsü nükleik asit fragmanının nispeten korunmuş bir bölgesini seçmek için gerçek zamanlı floresan PCR teknolojisini kullanır, spesifik primerler ve farklı floresan prob etiketleri tasarlar ve örneğin Monkeypox viral içerip içermediğini tespit etmek için RT-PCR teknolojisini kullanır. DNA.

[BİLEŞEN]

Not:

Tespit için farklı partilerden bileşenleri karıştırmayın.

Nükleik asit ekstraksiyon reaktifleri: Dewei tarafından üretilen Nükleik Asit Ekstraksiyon Reaktifini tavsiye edin.

Pozitif Kontrol kullanılırken nükleik asit ekstraksiyonuna gerek yoktur, Negatif Kontrol kullanılırken nükleik asit ekstraksiyonu gereklidir.

[DEPOLAMA VE KARARLILIK]

Kit, 12 ay boyunca -20±5 ℃'de saklanabilir.

7 gün boyunca 4 ℃'de geçici olarak saklayın.

Tekrarlanan dondurma ve çözme 7 katı, açma reaktifi 7 katı geçmemelidir.

Düşük sıcaklıkta nakliye sağlamak için kuru buz 4 günü geçmemelidir.

[ALETLER]

ABI7500, ABI7300, LightCycler480, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S ve QuantStudio gibi gerçek zamanlı PCR cihazı.

[NUMUNE ALMA VE İŞLEME]

• Uygun numune tipi: serum ve lezyon eksüda numuneleri.
  2. Toplama: Numune, standartlara uygun olarak steril tüplere toplanmalıdır.
  teknik özellikler.
  Saklama: Toplanan örnek tespit için hemen kullanılmalı veya dondurulmalıdır.
  ≤-20°C bir aydan fazla olmamalıdır. Tekrarlanan donma ve çözülmelerden kaçınılmalıdır.
  3. Taşıma: Numune buzlu kapalı köpük kutu kullanılarak taşınmalıdır.

[PROTOKOL]

• Numune Tedavisi ve Nükleik Asit Ekstraksiyonu (Örnek Tedavi Alanı)

Viral DNA ekstraksiyon kitlerinin ilgili gereksinimlerine ve prosedürlerine göre nükleik asit ekstraksiyonu için 200μL sıvı numune, Pozitif Kontrol ve Negatif Kontrol alınması önerilir.

• PCR Reaktif Hazırlama (Reaktif Hazırlama Alanı)

PCR tüplerini reaksiyon tankına koyun ve her reaksiyon kuyucuğunu karşılık gelen sıraya göre ayarlayın.

MVP PCR Reaktif A ve B'yi kitten çıkarın, oda sıcaklığında çözün, çalkalayın ve karıştırın, kullanmadan önce birkaç saniye 8.000 rpm'de santrifüjleyin.

N adet PCR reaksiyon tüpü alın (N = test edilecek numune sayısı + Negatif Kontrol + Pozitif Kontrol)

MVP tek amplifikasyon sisteminin konfigürasyonu aşağıdaki gibidir:

Bileşenleri iyice karıştırdıktan sonra, tüp duvarındaki tüm sıvının tüpün dibine santrifüjlenmesi için kısa bir süre santrifüjleyin ve ardından 20 µl amplifikasyon sisteminden PCR tüplerine dağıtın.

• Numune Alma (Numune Hazırlama Alanı)

Yukarıdaki PCR tüplerine her bir işlenmiş Negatif Kontrol, test edilecek örneğin nükleik asidi ve MVP pozitif Kontrolden 5µl ekleyin, tüp kapaklarını sıkın ve birkaç saniye 8000 rpm'de santrifüjleyin, ardından amplifikasyon saptamasına aktarın alan.

• PCR Amplifikasyonu (Amplifikasyon Alanı)

PCR tüplerini reaksiyon tankına koyun ve her reaksiyon kuyucuğunu karşılık gelen sıraya göre ayarlayın.

Tespit floresansının ayarları: (1) Monkeypox virüsü (FAM);(2)İç Kontrol (CY5).

Aşağıdaki döngü protokolünü çalıştırın: ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S ve QuantStudio, daha iyi çalışma için lütfen cihazın kullanım kılavuzuna bakın:

• Sonuç analizi (lütfen Cihaz Kullanım Kılavuzuna bakın)

Reaksiyondan sonra sonuçlar otomatik olarak kaydedilecektir.Analiz etmek için “Analiz Et”e tıklayın, cihaz sonuç sütunundaki her örneğin Ct değerlerini otomatik olarak yorumlayacaktır.Negatif ve pozitif kontrol sonuçları aşağıdakilere uygun olacaktır:

"5. Kalite Kontrol".

• Kalite kontrol

Negatif Kontrol: FAM kanalında Ct veya Ct>40 yok, normal amplifikasyon eğrisi ile CY5 kanalında Ct≤40.

Pozitif Kontrol: Normal amplifikasyon eğrisi ile FAM kanalında Ct≤35, normal amplifikasyon eğrisi ile CY5 kanalında Ct≤40.

Yukarıdaki tüm kriterler karşılandığında sonuç geçerlidir.Aksi takdirde sonuç geçersizdir.

[SONUÇLARIN YORUMLANMASI]

Aşağıdaki sonuçlar mümkündür:

NOT: Geçersiz sonuç ortaya çıkarsa, numunenin toplanıp tekrar test edilmesi gerekir.

[ALGILAMA SINIRLAMALARI]

Bu kitin saptama sonucu yalnızca klinik referans içindir ve doğrudan klinik tanı ve tedavi kanıtı olarak kullanılmamalıdır.Hastaların klinik yönetimi, semptomları, tıbbi geçmişi ve maruz kalma geçmişi ile birlikte düşünülmelidir.

Tespit sonucu, numune toplama, saklama ve nakliye dahil olmak üzere işlemlerden etkilenebilir.Operasyonda herhangi bir hata varsa yanlış negatif sonuç oluşabilir.Numune muamelesi sırasında çapraz kontaminasyon yanlış pozitif sonuca yol açabilir.

[PERFORMANS ÖZELLİKLERİ]

Algılama sınırlaması: 500 kopya /mL.

Kesinlik: Parti içi/partiler arası kesinliğin Ct değerinin varyasyon katsayısı (CV, %) ≤%5'tir.

Doğruluk: Negatif/pozitif referansın uygunluk oranı: %100.

Özgüllük: insan genomu ve aşağıdaki patojenler ile çapraz reaktivite yok: çiçek hastalığı virüsü, koyun çiçeği virüsü, aşı virüsü, su çiçeği virüsü, hepatit B virüsü, hepatit C virüsü, insan immün yetmezlik virüsü, enterovirüs.

[DİKKAT]

• Bu ürün sadece in vitro test için kullanılmaktadır.Lütfen kullanmadan önce bu kılavuzu dikkatlice okuyunuz.
• Tespit sırasında steril, DNase içermeyen ve RNase içermeyen tüpler ve uçlar kullanın.
• Tespit sırasında çapraz kontaminasyondan kaçınmak, uygun koruyucu ekipman, tek kullanımlık eldiven ve maske takmak ve zararlı maddelerin solunum yollarına girmemesi için biyogüvenlik kabininde işlemi tamamlamak gerekir.
• Kullanım sırasında cilt ve mukoza ile teması halinde, operatöre herhangi bir zarar vermeyecek şekilde akan su ile hemen yıkayınız.

Tüm sıvı reaktifler kullanımdan önce tamamen eritilmeli ve oda sıcaklığında karıştırılmalı ve kullanımdan önce 8000 rpm'de birkaç saniye santrifüjlenmelidir.

Kullanımdan sonra, kirliliği önlemek için ambalaj ve atık sıvı, tıbbi atık olarak eşit şekilde işlenmelidir.